DOI: 10.1051/vetres:2001118

Vet. Res. 32 (2001) 155-164

Detection of specific Mycoplasma conjunctivae antibodies in the sera of sheep with infectious keratoconjunctivitis

Luc Belloy^a, Marco Giacometti^b, El-Mostafa Abdo^a, Jacques Nicolet^a, Margrit Krawinkler^a, Martin Janovsky^c, Urs Bruderer^d and Joachim Frey<sup>a

a</sup>  Institute for Veterinary Bacteriology, University of Berne, Länggass-Strasse 122, 3012 Bern, Switzerland
^b  Wildvet Projects, 7605 Stampa, Switzerland
^c  Center for Fish and Wildlife Health, Institute of Animal Pathology, University of Berne, Länggass-Strasse 122, 3012 Bern, Switzerland
^d  Dr. Bommeli AG, Stationsstrasse 12, 3097 Liebefeld, Switzerland

(Received 6 November 2000; accepted 18 December 2000)

Abstract
The serological cross reactions between Mycoplasma conjunctivae, the etiological agent of infectious keratoconjunctivitis (IKC), and the antigenetically and phylogenetically closely related Mycoplasma ovipneumoniae, which is often found in sheep, were analysed. Cross reacting antigens were identified using sera from sheep with IKC and from sheep of herds known to be free of IKC, as well as rabbit hyperimmune serum specific to the two Mycoplasma species. Cross reactions were predominantly due to the strongly antigenic proteins of 42 kDa and 83 kDa. Serospecific antigens of M. conjunctivae could be separated from cross-reacting antigens by the extraction of Tween 20-soluble membrane proteins. The Tween 20-extracted proteins of the M. conjunctivae strain HRC/581T were used for the development of an indirect ELISA test. This ELISA test was shown to be a useful serological method for the diagnosis of M. conjunctivae infections and to identify infected sheep herds.

Résumé
Détection d'anticorps spécifiques de Mycoplasma conjunctivae dans les sérums de moutons atteints de kérato-conjonctivite infectieuse. Les réactions sérologiques croisées entre Mycoplasma conjunctivae, l'agent étiologique de la kérato-conjonctivite infectieuse (KCI), et Mycoplasma ovipneumoniae, qui lui est antigéniquement et phylogénétiquement le plus proche et qui est souvent présent chez le mouton, ont été analysées. Des sérums provenant de moutons atteints de KCI et de moutons issus de troupeaux exempts de KCI, ainsi que des sérums hyperimmuns de lapin spécifiques pour les deux espèces de mycoplasmes, ont permis l'identification des antigènes impliqués dans les réactions croisées. Les réactions croisées sont principalement dues aux protéines fortement antigéniques de 42 kDa et 83 kDa. Les antigènes sérospécifiques de Mycoplasma conjunctivae peuvent être séparés des antigènes provoquant une réaction croisée par une extraction des protéines membranaires au Tween 20. Les protéines de Mycoplasma conjunctivae HRC/581T extraites par le détergent Tween 20 ont été utilisées dans le développement d'un ELISA indirect. Cet ELISA s'est avéré être une méthode sérologique utile pour le diagnostique des infections dues à Mycoplasma conjunctivae ainsi que pour identifier les troupeaux de moutons infectés.

Key words: Mycoplasma conjunctivae / serodiagnosis / specific antigens / ELISA / Mycoplasma ovipneumoniae

Mots clés : Mycoplasma conjunctivae / sérodiagnostic / antigènes spécifiques / ELISA / Mycoplasma ovipneumoniae

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