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Vet. Res.
Volume 33, Number 2, March-April 2002
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Page(s) | 159 - 168 | |
DOI | https://doi.org/10.1051/vetres:2002004 | |
How to cite this article | Vet. Res. (2002) 159-168 |
Vet. Res. 33 (2002) 159-168
DOI: 10.1051/vetres:2002004
Use of a serum-free medium to produce in vitro Neospora caninum and Toxoplasma gondii tachyzoites on Vero cells
François De Meerschmana, Chantal Rettignera, Charles Focanta, Raphael Boreuxa, Christian Pinsetb, Thierry Leclipteuxa and Bertrand Lossonaaa Laboratory of Parasitology and Pathology of Parasitic diseases, Faculty of Veterinary Medicine, University of Liege, Bd de Colonster, 20, Building 43a, B-4000 Sart-Tilman, Liège, Belgium
b Laboratoire de développement cellulaire, Institut Pasteur, rue du docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15, France
(Received 4 May 2001; accepted 18 September 2001)
Abstract
Neospora caninum and Toxoplasma gondii are cyst-forming coccidian parasites
of human and veterinary clinical relevance. In vitro cultivation of the
protozoans using Vero cells is usually performed in order to produce antigenic
materials. Quantitative and qualitative comparisons of Vero cells grown in RPMI
medium supplemented either with foetal calf serum (FCS), horse serum (HS) or a
specific serum-free additive (DefCell) were performed. A serum-free cell culture
system used to propagate N. caninum (NC-1 isolate) and T. gondii tachyzoites
(Rh stain) were compared with the other two cell culture systems. FCS supplemented
media was found to be more effective than the others in promoting Vero cells
and N. caninum tachyzoites. However, it was found unable to support adequate
T. gondii tachyzoite proliferation. Vero cells, T. gondii and N. caninum tachyzoite
production gave similar growth patterns with either HS or DefCell supplemented media.
Defcell was considered as a good alternative to supplement culture medium.
Résumé
Utilisation d'un milieu sans sérum pour la production in vitro de tachyzoites
de Neospora caninum et Toxoplasma gondii sur cellules Vero.
Neospora caninum
et Toxoplasma gondii sont deux sporozoaires présentant un intérêt en médecine
humaine et vétérinaire. La culture in vitro utilisant, entre autres, les cellules
Vero comme support de la multiplication des deux parasites, est généralement
employée en vue de l'obtention de tachyzoïtes. Au cours de cette étude, une évaluation
quantitative et qualitative de la production de cellules Vero dans un milieu
complémenté en sérum de veau foetal, de cheval ou bien avec un additif (DefCell)
exempt de sérum, a été réalisée. Les trois types de milieu de culture ont également
été employés et comparés dans le cadre de la production sur cellules Vero de
tachyzoïtes de T. gondii (souche RH) et de N. caninum (isolat NC-1). Le milieu
complémenté en sérum de veau foetal s'est révélé être le plus adéquat pour la
croissance de cellules Vero et la production de tachyzoïtes de N. caninum. Cependant,
ce milieu s'est avéré incapable d'assurer une production optimale de tachyzoïtes
de T. gondii. La production de cellules Vero, ainsi que de tachyzoïtes de
T. gondii et de N. caninum, a présenté des caractéristiques communes en milieu
complémenté en sérum de cheval et en DefCell. Ce dernier s'est révélé être une
bonne alternative au sérum de veau foetal et de cheval pour complémenter les
milieux de culture. L'absence de protéines animales dans ce milieu présente
un certain nombre d'avantages qui sont discutés.
Key words: Neospora caninum / Toxoplasma gondii / cell culture / serum-free medium
Mots clés : Neospora caninum / Toxoplasma gondii / cellules Vero / milieu exempt de sérum
Correspondence and reprints: François DE Meerschman Tel.: (32) 43664098; fax: (32) 43664097;
e-mail: Francois.DeMeerschman@ulg.ac.be
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