DOI: 10.1051/vetres:2001137

Vet. Res. 32 (2001) 455-461

Determination of selamectin in dog plasma by high performance liquid chromatography with automated solid phase extraction and fluorescence detection

Jean-François Sutra^a, Marie-Christine Cadiergues^b, Jacques Dupuy^a, Michel Franc^c and Michel Alvinerie<sup>a

a</sup>  Laboratoire de Pharmacologie-Toxicologie, INRA, 180 Chemin de Tournefeuille, BP 3, 31931 Toulouse Cedex 9, France
^b  École Nationale Vétérinaire, 23 Chemin des Capelles, 31076 Toulouse, France
^c  Unité Associée INRA de Physiopathologie et Toxicologie expérimentales, école Nationale Vétérinaire, 23 Chemin des Capelles, 31076 Toulouse, France

(Received 19 January 2001; accepted 3 April 2001)

Abstract
A method is described for the determination of selamectin in dog plasma, using High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) with fluorescence detection (excitation and emission wavelengths fixed at 355 and 465 nm, respectively). The fluorescent derivative was obtained by condensation reaction with trifluoroacetic anhydride and N-methylimidazole. The method employs 1 mL plasma samples and gives linear calibration graphs (r = 0.999) over the concentration range studied (0.5 - 50 ngmL^-1). Automatic solid phase extraction using the benchmate procedure was used for sample preparation. This method permits the determination of selamectin at levels as low as 0.1 ngmL^-1 and its suitability was demonstrated by a pharmacokinetic study on a dog receiving the therapeutic dose (Spot-on administration).

Résumé
Dosage de la sélamectine dans le plasma de chien par chromatographie liquide haute performance avec une extraction en phase solide automatisée et une détection fluorimétrique. Cet article décrit une technique analytique qui permet de doser la sélamectine dans le plasma par chromatographie liquide haute performance, après formation d'un dérivé fluorescent ( excitation = 355 nm et émission = 465 nm). Ce dernier composé est obtenu grâce à une réaction de condensation utilisant l'anhydride de l'acide trifluoroacétique et le N-méthylimidazole. La technique requiert 1 mL de plasma et la courbe de calibration obtenue est linéaire dans la gamme de concentrations étudiée (0.5 - 50 ngmL^-1). Une extraction en phase solide automatisée a été employée pour traiter les échantillons. Cette méthode présente une limite de détection de 0.1 ngmL^-1 et apparaît efficace pour conduire des études de pharmacocinétique dans différentes espèces. Un exemple de cinétique plasmatique chez le chien ayant reçu une dose thérapeutique de sélamectine (Spot-on) est décrite.

Key words: selamectin / plasma / high-performance liquid chromatography / kinetics / dog

Mots clés : sélamectine / plasma / chromatographie liquide haute performance / cinétique / chien

Correspondence and reprints: Michel Alvinerie tel.: (33)5 61 28 51 37; fax: (33)5 61 28 53 10;
    e-mail: malviner@toulouse.inra.fr

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