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Vet. Res.
Volume 32, Number 5, September-October 2001
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Page(s) | 429 - 440 | |
DOI | https://doi.org/10.1051/vetres:2001135 | |
How to cite this article | Vet. Res. (2001) 429-440 |
Vet. Res. 32 (2001) 429-440
Immortalized goat milk epithelial cell lines replicate CAEV at high level
Laila Mselli-Lakhala, François Guiguena, Claudie Fornazeroa, Colette Faviera, Jitka Duranda, Delphine Grezela, Ali Moussab, Jean-Francois Mornexa and Yahia Cheblouneaa UMR INRA/ENVL/UCBL 754, Virologie moléculaire et cellulaire et maladies émergentes, École Vétérinaire de Lyon, BP 83, 69280 Marcy l'Étoile, France
b AFSSA, Laboratoire d'études et de recherches en pathologie bovine, 31 avenue Tony Garnier, BP 7033, 69342 Lyon Cedex 07, France
(Received 19 January 2001; accepted 2 April 2001)
Abstract
Primary milk epithelial cells were isolated from CAEV-uninfected goats and three cell
lines designated TIGMEC-1, TIGMEC-2 and TIGMEC-3 were established. The three cell
lines retained their morphological characteristics of epithelial cells and expressed
specific epithelial cytokeratin marker as well as the immortalizing SV40 large
T antigen. The kinetics of growth of TIGMEC1, TIGMEC2 and TIGMEC3 cell lines showed
a doubling time of 24-48 hours while the parental cell lines became senescent after
the passage 6 in cell culture. Like the parental primary cells, the three cell lines
were found to be highly sensitive to CAEV-pBSCA, an infectious molecular clone of
CAEV-CO strain, and to a French isolate CAEV-3112. TIGMEC cell lines infected with
CAEV-pBSCA became chronically infected producing high virus titers in absence of
cytopathic effects. These cell lines may be useful for study of the possible
physiological alterations in mammary epithelial cells infected with small ruminant
lentiviruses and their consequences on milk quality. On an other hand, these cell
lines can be used to study their role in virus transmission and pathogenesis.
Résumé
Des cellules épithéliales du lait immortalisées répliquent le CAEV avec une grande
efficacité.
Des cellules épithéliales primaires isolées à partir de chèvres non
infectées par le CAEV ont été immortalisées pour dériver 3 lignées appelées TIGMEC-1,
TIGMEC-2 et TIGMEC-3. Les cellules des 3 lignées ont conservé leurs caractéristiques
morphologiques de cellules épithéliales et expriment la cytokératine, un marqueur
spécifique des cellules épithéliales et l'antigène immortalisant T du virus SV40.
La courbe de croissance des lignées TIGMEC-1, TIGMEC-2 et TIGMEC-3 montre une
multiplication des cellules toutes les 24 à 48 heures alors que les cellules
parentales ne se divisent plus après 6 passages en culture. Comme les cellules
primaires dont elles dérivent, ces lignées se sont avérées sensibles à l'infection
par le CAEV-pBSCA, un clone moléculaire infectieux de la souche CAEV-CO, et un isolat
français le CAEV-3112. Les lignées TIGMEC infectées avec le CAEV-pBSCA deviennent
chroniquement infectées et produisent des titres élevés de virus en l'absence d'effet
cytopathogène. Ces lignées pourront être très utiles pour étudier les altérations
physiologiques éventuelles liées à l'infection de cellules épithéliales par les
lentivirus des petits ruminants et pouvant avoir des conséquences sur la qualité
du lait. Par ailleurs, ces cellules pourraient être utilisées pour étudier le rôle
des cellules épithéliales du lait dans la transmission du virus et l'induction de
pathologie.
Key words: CAEV / replication / epithelial cell line
Mots clés : CAEV / réplication / lignées cellulaires épithéliales
Correspondence and reprints: Yahia Chebloune tel.: (33) 4 78 87 25 68; Fax: (33) 4 78 87 25 94;
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