Free access
Issue
Vet. Res.
Volume 32, Number 6, November-December 2001
Page(s) 581 - 590
DOI http://dx.doi.org/10.1051/vetres:2001147
How to cite this article Vet. Res. (2001) 581-590
DOI: 10.1051/vetres:2001147

Vet. Res. 32 (2001) 581-590

Histochemical detection of the lectin-binding carbohydrates in the zona pellucida during oocyte growth in the wild boar (Sus scrofa scrofa)

Francesco Parilloa, Silvana Diverioa, Luca Todinib and Oliviero Fagiolib

a  Department of Biopathological Veterinary Science, Faculty of Veterinary Medicine, Perugia University, via San Costanzo 4, 06126 Perugia, Italy
b  Department of Veterinary Science, Faculty of Veterinary Medicine, Camerino University, via Circonvallazione 93/95, 62024 Matelica (MC), Italy

(Received 18 December 2000; accepted 18 June 2001))

Abstract
The changes that occur in the carbohydrate composition of zona pellucida glycoproteins during oocyte maturation in the wild-boar were studied using periodic-acid Schiff (PAS), High Iron Diamine (HID) and Low Iron Diamine (LID). Lectin staining was performed with a panel of 11 HRP-lectin conjugates combined with neuraminidase digestion and chemical treatments. There were few internal glucidic residues, such as N-acetylglucosamine, in the wild boar zona pellucida but there were many subterminal $\beta$-N-acetylgalactosamine, $\alpha$- and $\beta$-galactose determinants masked by sialic acid. In addition, $\beta$-N-acetylgalactosamine, $\beta$-galactose-(1-3)-N-acetylgalactosamine and $\beta$-galactose- (1-4)-N- acetylglucosamine were detected in the sulphated form in the terminal and/or subterminal position. Some differences in the lectin reactive sites occurred in the zona pellucida, depending on the stage of oocyte maturation.

Résumé
Détection histochimique des carbohydrates liant les lectines dans la zone pellucide pendant la croissance de l'ovocyte chez le sanglier (Sus scrofa scrofa). Les changements apparaissant dans la composition en carbohydrates des glycoprotéines de la zone pellucide pendant la maturation des oocytes chez le sanglier ont été étudiés en utilisant l'acide périodique Schiff, la diamine riche en fer et la diamine pauvre en fer. La coloration des lectines a été réalisée en utilisant 11 conjugués lectine-péroxydase combinés à une digestion par la neuraminidase et des traitements chimiques. Il y avait peu de résidus glucidiques internes tels que la N-glucosamine, présents dans la zone pellucide du sanglier mais il y avait de nombreux déterminants $\beta$-N acétylgalactosamines subterminaux et des déterminants $\alpha$- et $\beta$-galactose masqués par de l'acide sialique. De plus, de la $\beta$-N acétylgalactosamine, $\beta$-galactose-(1-3)-N-acétylgalactosamine et de la $\beta$-galactose-(1-4)-N acétylglucosamine ont été détectées sous forme de sulfate en position terminale et/ou subterminale. Des différences dans les sites réactifs de lectines se sont produites dans la zone pellucide en fonction du stade de maturation de l'ovocyte.


Key words: zona pellucida / glycoprotein / lectin-histochemistry / wild-boar

Mots clés : zone pellucide / glycoprotéine / lectine / sanglier

Correspondence and reprints: Francesco Parillo Tel.: (39) 75 5857631; fax: (39) 75 5857631; e-mail : silvana@unipg.it

© INRA, EDP Sciences 2001