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Issue
Vet. Res.
Volume 33, Number 1, January-February 2002
Page(s) 71 - 82
DOI http://dx.doi.org/10.1051/vetres:2001007
How to cite this article Vet. Res. (2002) 71-82


Vet. Res. 33 (2002) 71-82
DOI: 10.1051/vetres:2001007

Effect of 1-24ACTH administration on sheep blood granulocyte functions

Saverio Paltrinieri, Simona Panelli, Stefano Comazzi and Paola Sartorelli

Dipartimento di Patologia Animale, Igiene e Sanità Pubblica Veterinaria, Sezione di Patologia Generale Veterinaria e Parassitologia, via Celoria 10, 20133 Milano, Italy

(Received 8 March 2001; accepted 27 August 2001)

Abstract
The objective of the present study was to determine the efficiency of blood neutrophils (PMN) taken from sheep during acute stress. Ten healthy Charolle sheep were sampled before treatment (T0) and 1 (T1), 2 (T2), 24 (T24) and 48 (T48) hours after 1-24ACTH administration. Ten sheep serving as the controls were sampled at the same time intervals, using saline solution instead of 1-24ACTH. At each time sampling, rectal temperature, heart rate, cortisol, glucose, non-esterified fatty acids (NEFA), total and differential leukocyte counts were evaluated. PMN were isolated after centrifugation of whole blood and hypotonic lysis of RBC. Chemotaxis was evaluated on a modified Boyden chamber using a nitrate cellulose filter and both Zymosan activated serum (ZAS) and interleukin-8 (IL-8) as chemoattractants. Phagocytosis was measured using both non-opsonized latex beads and fluoresceinated yeasts opsonized with homologous serum. Superoxide (O 2-) production was evaluated by measuring superoxide dismutase-inhibitable reduction of ferricytochrome C, and adherence by a colorimetric assay of acid phosphatase activity of adherent cells. The administration of 1-24ACTH induced an acute stress reaction, indicated by the presence of clinical, biochemical and hematological changes. Adherence significantly increased from T0 to T2 in treated sheep. This might be responsible for the depression of non-specific immunity in stressed animals. Studies using stressors other than 1-24 ACTH are needed to verify the influence of other components of the stress reaction on PMN functions.

Résumé
Effets de l'administration de 1-24ACTH sur la fonction des granulocytes sanguins de brebis. L'objectif de cette étude a été la détermination de l'efficacité des neutrophiles (PMN) prélevés à des brebis pendant un stress aigu. Pour cela, nous avons effectué des prélèvements de sang à 10 brebis Charolle saines avant d'administrer du 1-24ACTH (T0) et, de nouveau, 1 (T1), 2 (T2), 24 (T24), 48 (T48) heures après ce traitement. Comme contrôle nous avons fait des prélèvements de sang à 10 brebis auxquelles nous avions administré de la solution saline au lieu de 1-24ACTH. A l'occasion de chaque prélèvement nous avons déterminé la température, la fréquence cardiaque et les niveaux sanguins de cortisol, glucose, acides gras non-esterifiés, des leucocytes totaux et différenciés. Nous avons isolé les PMN après centrifugation du sang et lyse hypotonique des hématies. Afin de vérifier l'activité chimiotactique des PMN, nous avons utilisé une chambre de Boyden modifiée ainsi que du sérum activé par le Zymosan (ZAS) et de l'interleukine-8 (IL-8) comme chimioattractants. Afin de mesurer la phagocytose, nous avons utilisé aussi bien des particules de latex non-opsonisées que de la levure opsonisée avec du sérum homologue marqué à la fluorescéine. Ensuite, nous avons quantifié la production d'anion superoxyde en mesurant la réduction (inhibée par l'enzyme superoxyde dismutase) du ferricytochrome C, et l'adhérence (par un essai colorimétrique qui se base sur l'activité de phosphatase acide des cellules adhérentes). L'administration de 1-24ACTH provoque un état de stress aigu, comme l'indique la présence d'altérations cliniques biochimiques et hématologiques. L'administration de 1-24ACTH provoque aussi une augmentation de l'adhérence de T0 à T2. Cette variation est peut-être responsable de la diminution de l'immunité non-spécifique chez les animaux sujets au stress. Afin de vérifier l'influence d'autres composants de la réaction du stress sur la fonction des PMN, il est nécessaire d'utiliser des agents stressants différents de 1-24ACTH.


Key words: sheep / PMN / ACTH / stress / phagocytosis

Mots clés : mouton / PMN / ACTH / stress / phagocytose

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